一、動態(tài)光散射儀操作前準備
環(huán)境要求
選擇平穩(wěn)、干燥、溫度適宜的場所安裝儀器，確保儀器底部與地面平穩(wěn)接觸，光路垂直地面，且儀器底部離地面至少50cm。
避免空氣流動、震動及強電磁干擾源(如大型電機、高頻設備)，確保測量環(huán)境穩(wěn)定。
樣品制備
分散性：樣品需均勻分散在液體介質中，避免團聚或沉淀。
濃度控制：
蛋白質樣品：14kDa蛋白濃度建議1mg/ml，28kDa蛋白濃度建議0.5mg/ml。
其他樣品：根據粒徑大小調整濃度，避免多重光散射(濃度過高)或信號過弱(濃度過低)。
除氣泡：樣品需12,000rpm離心10分鐘，取上清液，避免氣泡影響測量。
樣品量：樣品池容量約14μl，建議準備20μl樣品以確保填滿。
儀器檢查
檢查電源、連接線、光路系統(tǒng)是否正常，確保激光器、探測器、溫控模塊等部件連接牢固。
預熱儀器10-15分鐘，待系統(tǒng)穩(wěn)定后進行測量。
二、操作步驟
開機與軟件連接
接通電源，依次打開主機、溫控模塊及計算機電源。
運行測量軟件(如Zetasizer、IRSoft等)，點擊“Connect”或“Hardware”建立軟件與儀器的連接，確認連接成功后圖標變綠。
樣品加載
用水沖洗微量取液器和樣品池，避免污染。
使用微量取液器將樣品緩慢注入樣品池，避免針頭刮碰池底或側壁。
將樣品池放入樣品室，確保箭頭朝向自己，蓋上樣品室蓋子。
參數設置
儀器參數：
激光強度：根據樣品濃度調整(高濃度樣品需降低功率以避免信號過載)。
溫度：設置測量溫度(如25℃)，恒溫120秒使樣品溫度穩(wěn)定。
溶劑參數：
輸入溶劑的折光率(RI)和粘度(Viscosity)，參數隨溫度變化需實時更新。
樣品參數：
輸入樣品的折光率(RI)和吸收率(Absorption)，如蛋白質樣品需選擇“Material”類型并輸入對應參數。
測量參數：
測量時間：根據樣品穩(wěn)定性設置(如連續(xù)測量3次，每次120秒)。
散射角度：通常選擇90°(小顆粒)或173°(大顆粒)。
數據過濾：設置偏差范圍(如Baseline=1±0.003)，過濾異常數據。
數據采集
點擊“Start”或“Measure”開始測量，儀器自動記錄散射光強度隨時間的變化。
測量過程中避免觸碰儀器或樣品池，防止光路偏移。
紅色數據為超出設定范圍的值，分析時不采用。
數據分析
粒徑分布：軟件自動計算流體力學半徑(Rh)及多分散性指數(PDI)，生成粒徑分布圖(如對數正態(tài)分布、MSD多尺寸分布)。
相關性函數：分析光強波動與時間的關系，評估樣品均一性。
數據導出：保存為CSV、Excel或PDF格式，便于進一步處理或報告生成。
三、動態(tài)光散射儀操作后維護
清潔與保養(yǎng)
測量完成后，立即用水沖洗樣品池，吹干后存放，避免殘留樣品污染。
定期清潔光學元件(如激光窗口、探測器)，使用無塵布或專用清洗劑。
檢查儀器內部是否有雜物或塵埃，保持光路系統(tǒng)干燥管吸潮狀態(tài)(如吸潮需烘干再生)。
校準與驗證
定期使用標準粒子(如聚苯乙烯乳膠)進行校準，確保測量準確性。
檢查儀器連接是否正常，各部件安裝是否牢固，進行電磁兼容性測試。
存儲與安全
儀器不使用時，存放在干燥、通風、無腐蝕性氣體的環(huán)境中，斷開電源并蓋上防塵罩。
避免與危險化學品接觸，防止安全事故。
